精品推荐 I 耐高温耐抑制剂逆转录酶
1970年,Temin 和 Baltimore 从逆转录病毒中发现了逆转录酶 (RTase),它具有依赖于 RNA 的 DNA 聚合酶 (RDDP),依赖于 DNA 的 DNA 聚合酶 (DDDP) 以及切割 RNA-DNA 异源双链的核糖核酸酶 H(RNase H) 三种活性。
几十年来,RTase 已经成为分子生物学中的一个关键工具,RTase 以 mRNA 为模板,由随机引物、oligo(dT) 或基因特异性引物引导,合成互补的 DNA(complementary DNA,cDNA),再以 cDNA 为模板,可扩增出不含内含子的基因序列。这样将逆转录与 PCR 扩增技术结合,大大推动了分子生物学、遗传学和医学领域的发展。
| 产品简介 |
M-MLV GIII Reverse Transcriptase 是通过基因修饰和重组技术获得的第三代 M-MLV 逆转录酶。该酶相对于野生型 M-MLV 逆转录酶去除了 RNase H 活性,并大幅提高了热稳定性(最适反应温度为 50℃),从而大大提高了合成第一链 cDNA 时的特异性和长度,增强了对 RNA 复杂二级结构的耐受性。
| 产品优势 |
- 高纯度,无核酸酶污染,无宿主 DNA 污染
- 温度适应范围广,42℃~65℃均可完成逆转录反应
- 抑制剂耐受性强,对于 Trizol、SDS 等 RNA 提取中易于引入的污染具有更强的耐受能力
| 性能展示 |
1、无RNA酶污染残留
M-MLV GIII Reverse Transcriptase(BE RTIII)和番茄RNA在37℃下孵育1h,孵育产物进行琼脂糖凝胶电泳。结果显示RNA无明显变化,即百时美逆转录酶产品中无RNase污染。
2、42-65℃下高效合成cDNA
分别使用百时美(BE)、A公司、B公司的逆转录酶,以RNA Marker为底物,在42℃、50℃、55℃、60℃和65℃不同温度下,按照各品牌推荐的实验体系,反应30min,逆转录产物进行琼脂糖凝胶电泳。结果显示百时美逆转录酶在更宽的温度范围内有效合成长达9Kb的cDNA产物。
3、最快10min即可反应完成
分别使用百时美(BE)、A公司、B公司的逆转录酶,以RNA Marker为底物,按照各品牌推荐的实验体系和温度,分别反应10、20、30min,逆转录产物进行琼脂糖凝胶电泳。结果显示百时美逆转录酶10min即可有效合成长达9Kb的cDNA产物。
4、适应不同表达丰度基因
分别使用百时美(BE)、A公司、B公司的逆转录酶,以100ng Human RNA为模板,按照各品牌推荐的实验体系和温度,并结合qPCR技术测试不同表达丰度基因逆转录合成效率。结果显示不同表达丰度的基因,百时美逆转酶均能够有效的逆转录合成cDNA产物。
5、GIII具有较好的抑制剂耐受性
分别使用百时美(BE)、A公司、B公司的逆转录酶,以100ng番茄RNA为模板,按照各品牌推荐的实验体系和温度,并结合qPCR技术测试在含有Trizol、SDS等抑制剂时不同表达丰度基因逆转录合成效率。结果显示百时美逆转录酶对上述抑制剂有较好的耐受性,竞品公司的产品均不耐受0.004%SDS。
| 应用场景 |
可用于 First strand cDNA 合成、Second strand cDNA 合成、RNA primer extension、RT-PCR、RT-qPCR、RT-LAMP 和 cDNA 文库构建等。
| 订购信息 |
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