原料酶选择之困:酶的异质性解析
酶的异质性及其表现
与化学品不同,不同厂家生产的相同名称的酶,在活力、性能和应用场景上往往有显著差异,我们称之为酶的异质性。主要表现为以下4个方面:
1、名不符实。也就是同一个名称下其实是不同的蛋白。典型例子就是限制酶的同裂酶,同裂酶的反应条件、底物偏好往往存在差异,不能简单替换。
▶不同厂家的限制酶同裂酶效果对比(引自国外某公司网站)
2、改造策略不同。比如最常用的Taq酶,各家都有自己的突变体,虽然效果优于野生型,但也带来了缓冲液和抗体不通用等诸多问题(详见 你购买的Taq酶抗体好用么?)。
3、酶活定义不同。比如几家主要厂商T4连接酶的活性定义存在上百倍的差异,导致用户选择时产生困惑(详见 探秘T4连接酶:基因“分子缝合针”)。
4、生产工艺不同。例如,不同的纯化标签可能带来活性或稳定性的变化;大肠杆菌表达的Taq酶就不适用于检测肠道微生物;疫苗生产使用的酶不能用肝素纯化等等。
愚公生物怎么做
酶的异质性及其带来的种种问题,是用户选择酶、使用酶的最大痛点。面对异质性带来的种种问题,愚公生物怎么做呢?
对于酶活定义差异较大的酶,比如T4连接酶等,会提供换算表格,方便用户比较。
2. 应用多元化,厂家的体系不能互换怎么办?那就将更多数据呈现给客户,减少客户的麻烦。比如我们把愚公生物限制酶在不同厂商缓冲液中的活性,制成详细表格,方便用户使用不同品牌的限制酶实现双酶切。
对于Taq DNA聚合酶抗体,我们建立了一个Taq酶抗体库,筛选了对常见突变体活性的封闭效果,方便客户去适配抗体(详见 你购买的Taq酶抗体好用么?)
3. 坚持只做高纯度、低杂质酶。优化生产工艺,完善质量控制,提高单次产量,减少批次差异,保证从愚公生物出厂的产品前后一致。