常见问题解答
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Q:
M21:制备片段和载体时可以用TE Buffer进行洗脱和储存吗?
A:可以,TE Buffer不影响连接效率。
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Q:
M22:不小心将DNA Assembly Mix Smart室温放置后能继续使用吗?
A:DNA Assembly Mix Mono和DNA Assembly Mix Ultra于37℃储存7天无性能下降,DNA Assembly Mix Smart于37℃储存16天无性能下降,故短时间室温放置不影响活性。
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Q:
Q1:RNase A是什么来源?
A:来源牛胰腺。
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Q:
Q2:RNase GG可以做精确的限制性RNA酶解吗?
A:可以,但是酶不能过量,可能需要根据序列和底物量调整酶量。
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Q:
Q3:RNase GG酶切后的末端是什么样的?
A:酶切后3'末端应该是2'-3'环磷酸,5‘端结构暂无数据。
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Q:
Q4:RNase GG是否可以在纯水中做酶切?
A:可以直接在水里进行酶切。
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Q:
Q5:RNase GG可以在高浓度尿素中酶切吗?
A:暂无数据,该酶能够切双链RNA,不需要尿素变性。
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Q:
Q6:T4 DNA Ligase(Fast) 与不同厂家酶活之间的换算关系是什么样的?
A:Thermo 货号EL0011:5 U/μl = 5 U/μl(5 Weiss U/μl);
NEB货号M0202S:400 U/μl = 2 U/μl(2 Weiss U/μl);
Takara货号 2011A:350 U/μl = 2.8 U/μl(2.8 Weiss U/μl) -
Q:
Q7:10× T4 DNA Ligase缓冲液有沉淀析出正常吗?
A:这种是正常现象,DTT低温析出,缓冲液解冻后涡旋1~2 min 可以复溶。
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Q:
Q8:重组蛋白酶K用什么缓冲液溶解?
A:20mM Tris-HCl, 1mM CaCl ,50%甘油,pH 7.4@25℃
