产品介绍
基于重组原理的无缝克隆技术，作为新一代的克隆方法，不依赖繁琐的酶切、连接步骤，也不需要末端补平等操作，依据DNA片段与线性化载体末端的15~25 nt 同源序列的重组，可将插入片段克隆至任意载体的任意位点，载体自连背景极低，是一种简单、快速、高效的DNA定向克隆技术。
DNA Assembly Mix Smart单次反应可完成1~15个片段的组装，最快仅需1 min即可完成单片段重组，且阳性率高于95%。通过优化缓冲液组分与酶的配比，DNA Assembly Mix Smart与DNA Assembly Mix Ultra相比显著提升了对未纯化PCR产物的耐受性及产品稳定性，无惧氧化、冻融影响。此外，DNA Assembly Mix Smart与DNA Assembly Mix Ultra同样使用HiFi Taq DNA Ligase，连接保真度高。
产品组成
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组分 |
规格 |
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DNA Assembly Mix Smart |
250 μl |
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pUC19 Control Plasmid, Linearized (Ampʳ, 40 ng/μl) |
5 μl |
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500 bp Control Fragment (20 ng/μl) |
5 μl |
储存条件
-20℃保存 2 年
性能展示
兼容性
使用愚公EG24204和EG26208对不同品牌高保真PCR mix的未纯化产物进行连接，结果如下：
EG26208可有效兼容不同品牌高保真PCR mix。
注：以上PCR产物均没有明显杂带，否则阳性率会显著下降。
使用愚公EG24110和竞品W的未纯化PCR产物比较不同品牌无缝克隆产品对PCR产物的耐受性，结果如下：
愚公EG26208在不同场景下对未纯化产物的耐受性均处于最佳梯队。
连接效率
将LacZ全长基因拆分成15个片段后连接至5k的载体后转化至大肠杆菌感受态，经IPTG诱导后阳性菌落在X-gal平板显蓝色，并挑取10个蓝色菌落进行菌落PCR，结果如下：
EG26208可有效连接15个片段。
底物量范围
EG26208在0.006~0.15pmol底物用量范围内有较好的连接效果。
EG26208在0.006~0.15pmol底物用量范围内有较好的连接效果。
EG26208在0.006~0.15pmol底物用量范围内有较好的连接效果。
加速、冻融稳定性
EG26208在37℃储存16天和冻融20次条件下连接效率无下降。
氧化稳定性
与EG20204相比，EG26208进一步提高了抗氧化性，在高温+氧化双重胁迫下连接效率无下降。
